Genel Araştırma

Dilüsyon yöntemleri, antibiyotiklerin minimum inhibitor konsantrasyonlarını (MİK) saptamak için kullanılır. Yani bakteriyi en az ne kadar antibiyotikle yok ederiz sorusunun cevabıdır. Antibiyotik duyarlılık testlerinde referans testlerdir. MİK yöntemleri direnç sürveyansı, rutin testlerde eşdeğer sonucu olan mikroorganizmaların duyarlılığının saptanması, yeni ilaçların kıyaslanması, rutin testlerin güvenilir olmadığı mikroroganizmaların test edilmesi ve tedavide kantitatif bir sonuç gerektiğinde kullanılır. Belirli bir süre içinde bir mikroorganizmanın gözle görünebilen üremesini engelleyen en düşük antibiyotik konsantrasyonu (mg/l) MİK olarak adlandırılmaktadır. MİK, mikroorganizmanın duyarlılığına ilişkin klinisyene bir rehberdir ve tedaviye karar verirken yardımcı olmaktadır. 1) Sıvı Dilüsyon Yöntemi a) Makrodilüsyon (Tüp) Yöntemi Eşit hacimdeki buyyon ve antibiyotik çözeltisi içeren kaplara (genellikle artan geometrik konsantrasyonlarda) belli sayıda mikroorganizmanın inoküle edildiği bir tekniktir. Her antimikrobik ilaç için test edilecek konsantrasyonlar, bakteri ve ilaca göre değişmektedir. b) Sıvı Mikrodilüsyon Yöntemi Sıvı dilüsyon testinin mikrodilüsyon plaklarında yapıldığı şeklidir. Burada tanımlanan yöntem bir gecelik agar kültüründe kolay üreyen ve Mueller Hinton buyyonda kolay üreyebilen aerobik bakterilerin saf kültürleri içindir. Bu yönteme mikrodilüsyon denilmesinin nedeni, besiyerlerinin küçük hacimlerde yuvarlak ya da konik tabanlı kuyucukları olan steril plastik mikrodilüsyon plaklarına dağıtılmasından dolayıdır. Her kuyucuk 0.1 mL sıvı içermelidir. 2) Agar Dilüsyon Yöntemi Antimikrobik ilaç, her plakta farklı konsantrasyonda ilaç bulunacak şekilde agar besiyerine karıştırılır. İnokülumlar eşzamanlı ve hızla her plağa 32 ila 36 inokülum aktarabilen aletler (replikatör) ile agar yüzeyine bırakılır. Günümüzdeki replikatörlerin çoğu her bir plağa 32 ila 36 inokülum aktarabilmektedir. Üremeyi inhibe eden en düşük ilaç konsantrasyonu MİK olarak kaydedilir. Ancak, tek bir koloni üremesi veya inokülumun neden olduğu üreme benzeri bir iz dikkate alınmaz. 3) Gradiyent Testi Bunun en önemli üstünlüğü, 150 mm lik bir agar plağında beş farklı ilaç için MİK değerlerinin belirlenebilmesidir. Kaynak